DNA半保留复制:将一个完全被放射性标记的DNA分子放于无放射性标记的环境中复制三代后,所产生的全部DNA分子中,无放射性标记的有:6个。
DNA复制、转录互补结构或反密码子的推断:反向(右→左)读取,正向书写
冈崎片断:复制中的不连续片断
参与DNA复制的物质:
1、底物(原料):dNTP
2、聚合酶:依赖DNA的DNA聚合酶(DNA-pol或DDDP)
3、模板:解开成单链的DNA母链
4、引物:提供3’-OH的短链RNA分子(由引物酶催化合成)
5、其他酶和蛋白质因子:包括拓扑异构酶、连接酶、SSB(稳定已解开的单链)、Dna蛋白(DnaA-辨认起始点;DnaB-解螺旋酶;DnaC-运送和协同DnaB;DnaG-引物酶)
原核生物的3种DNA聚合酶:
DNA-polⅢ是原核生物复制延长中真正起催化作用的酶;
3种DNA-pol都具有5’→3’聚合活性及3’→5’核酸外切酶活性;
只有DNA-polⅠ具有5’→3’外切酶活性
原核生物的DNA生物合成:
1、复制起始:参与的酶有拓扑异构酶、Dna蛋白和SSB
2、复制过程中具有催化3’,5’-磷酸二酯键生成的酶有:引物酶、DNA聚合酶、拓扑异构酶、DNA连接酶
3、拓扑异构酶的作用:解开DNA超螺旋;切断单链DNA;连接3’,5’-磷酸二酯键
4、复制的终止过程包括去除RNA引物和换成DNA,最后把DNA片段连接成完整的子链(片断连接时由ATP供能);需要的酶:RNA酶、DNA-polⅠ、连接酶