一、名词解释(每题5分,共30分)
1. Specific activity
2. Restriction endonuclease
3. PCR
4. 盐析
5. 稀有氨基酸
6. 酶原的激活
二、判断题(每题2分,共20分)
1. 羧肽酶A水解一个肽链,发现释放最快的是Leu,其次是Gly,据此推断肽段C末端为Gly-Leu.
2. 核酸在pH3.5的缓冲液中电泳时,方向为从正极到负极。
3. 同工酶催化的反应是完全相同的,且反应速率也是相同的。
4. 斐林试剂盒本尼迪特试剂在水浴加热中均能被单糖还原为砖红色沉淀,
5. 一种氨酰tRNA合成酶可催化多种氨基酸的活化转运。
6. 氨甲酰磷酸可以合成尿素和嘌呤。
7. DNA的Tm值随(A+T)/(G+C)比值的增加而减少。
8. 脂肪酸从头合成中,将糖代谢生成的乙酰CoA从线粒体转移到细胞溶胶中的化合物是苹果酸。
9. 反应平衡时,决定酶催化反应中底物转变为产物的速度参数是Kcat
10. α-淀粉酶与β-淀粉酶的的区别在于α-淀粉酶α-1,4糖苷键,β-淀粉酶水解β-1,4糖苷键。
三、简答题(每题10分,共40分)
1. 简述凝胶过滤蛋白质原理。以凝胶电泳过滤肌红蛋白、过氧化氢酶、细胞色素C、肌球蛋白、糜蛋白酶以及血清蛋白的顺序。
2. 简述维持蛋白质三级结构作用力。
3. 微生物在无氧条件下将糖酵解产物转化为乙醇、乳酸、甘油的过程、酶及辅因子。
4. 简述ATP、ADP、AMP和柠檬酸在糖酵解和三羧酸循环中调节代谢的作用。
四、简答题(每题15分,共60分)
1.25mg蛋白酶配置成25ml溶液,取其中2ml测定其蛋白氮含量为0.2mg。另取0.1ml测酶活力,每小时水解产生1500mg酪蛋白。酶活力单位规定为每分钟产生1mg酪蛋白的酶量。求,
(1)酶溶解液蛋白液浓度(mg/mL),酶活力(U/mL),比活(U/mg)
(2)每克纯酶制剂总蛋白含量mg及总活力U。
2. 线粒体内膜上的磷酸甘油穿梭系统和肉毒碱穿梭系统分别用于转运什么物质,参与哪个代谢途径,两侧分别发生了什么反应?
3. 试述糖代谢与脂代谢关系。
4. 糖酵解过程中,磷酸果糖激活酶活性受到变构效应物的调节。现根据一组实现,得出加入果糖-2,6二磷酸(F-2,6-BP)对磷酸果糖激酶反应相对速度的影响曲线。请据下图归纳果糖-6-磷酸和ATP对该酶活性的调节作用。(与15年801生化真题的最后一题一样)